پارپوینت کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC)

— پاورپوینت شامل تصاویر میباشد —-

اسلاید ۱ :

توضیحی در مورد کروماتوگرافی

کروماتوگرافی لغتی یونانی به معنی رنگ نگاری است که ترکیبی از دو واژه “کروما” به معنی رنگ و “گروفین” به معنی نوشتن است. در سال ۱۹۰۳ برای اولین بار از این روش جداسازی مواد رنگی استفاده شد که این کار توسط میخائیل‌سوئت انجام گرفت. اما امروزه از این روش برای جداسازی مواد بی رنگ چون گازها استفاده می‌شود یکی از پرکاربردترین روش‌های جداسازی مواد در آزمایشگاه کروماتوگرافی است و در مواقعی که جداسازی به روش‌های دیگر ناممکن است به راحتی می‌توان از این روش استفاده کرد، زیرا اختلافات‌های جزئی موجود در رفتار اجسام باعث تسهیل جداسازی در جریان عبور آن‌ها از یک سیستم کروماتوگرافی می‌شود‌. این روش بسیار ساده و سریع است به طور مثال آزمایشی که ممکن است با استفاده از روش ستون تقطیر چندین روز به طول بینجامد، می‌تواند به کمک کروماتوگرافی در عرض زمانی بسیار کوتاه انجام گیرد، وسایل مورد لزوم آن نیز ارزان قیمت است.

اسلاید ۲ :

میدان HPLC

فاز ساکن : فاز ساکن در HPLC در ستون هایی از جنس فولاد ضد زنگ به طول ۱۰

-۱۵-۲۵-۳۰-۵۰- و یا ۱۰۰ سانتی متر و با قطر ۲-۶ میلی متر پر می شود. عوامل

موثردر انتخاب فاز ساکن HPLC عبارتند از : طبیعت مواد مورد تجزیه – راندمان

جداسازی مورد نیاز – ظرفیت بارگذاری ستون .

از جاذب های جامد به عنوان فاز ساکن جهت جداسازی مولکولهای با جرم مولکولی

نسبتا کم و با قطبیت کم استفاده می شود.سیلیکاژل متداولترین فاز ساکن جامد مورد

استفاده در HPLC است

آلومین , جامد جذاب دیگری است که در HPLC به کار می رود و چون یک

ترکیب قلیایی است مواد اسیدی را بر روی خود نگه می دارد.

اسلاید ۳ :

فاز متحرک

عموما فاز متحرک حاوی مخلوطی از حلالهای قطبی نظیر الکل و غیر قطبی

نظیر هیدروکربنها است. با کنترل ترکیب و قطبیت فاز متحرک در روش

گرادیان حلال می توان زمان و حجم باز داری مواد را در ستون HPLC کنترل

نمود.فاز متحرک در HPLC باید چنان انتخاب شود که در آشکار ساز مزاحمت

ایجاد نکند . معمولا مخلوطهای متانول , اتانول یا پروپانول با هپتان و کلروفرم با

هپتان را به عنوان فاز متحرک در HPLC مورد استفاده قرار می دهند. در HPLC

فاز معکوس عموما از مخلوط متانول یا استونیتریل با آب به عنوان فاز متحرک

استفاده می شود.

اسلاید ۴ :

مزایای این روش

      کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا سریعترین رشد را در بین تمام فنون جداسازی تجزیه ای با فروش سالیانه در گستره میلیارد دلار داشته است .

      و دلیل این محبوبیت:

۱- حساسیت روش

۲- سازگاری آن برای انجام اندازه گیریهای کمی صحیح

۳- مناسب بودن آن برای جداسازی گونه های نافرار یا ناپایدار گرمایی

۴- کاربرد گسترده آن برای مواد پراهمیت در صنعت

۵- زمینه های مختلف علوم و جامعه

اسلاید ۵ :

کاربرد های کروماتوگرافی مایع

برای مواد حل شده ای که وزن مولکولی بزرگتر از ۱۰۰۰۰ دارند کروماتوگرافی طردی

برای گونه های یونی با وزن مولکولی پایین کروماتوگرافی تبادل یونی

گونه های کوچک قطبی اما نایونی از کروماتوگرافی تقسیمی

و برای جداسازی گونه های ناقطبی , ایزومرهای ساختاری و دسته ترکیباتی از قبیل هیدروکربنهای آلیفاتیک از الکلهای آلیفاتیک از کروماتوگرافی جذب سطحی استفاده می کنند.